A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica de pedra angular na biologia molecular, permitindo a amplificação de segmentos de DNA específicos para várias aplicações, como clonagem de genes, testes genéticos e diagnóstico de doenças. A qualidade da água usada na PCR é crítica, pois os contaminantes podem inibir a reação ou introduzir resultados falsos. Como fornecedor de sistemas de água do LAB EDI (Eletrodeionização), muitas vezes me perguntam se nossos sistemas podem ser usados para PCR. Nesta postagem do blog, explorarei os requisitos para a água do grau de PCR, as capacidades de nossos sistemas de água do Lab EDI e a adequação de nossos produtos para aplicações de PCR.
Requisitos para água de grau de PCR
As reações de PCR são altamente sensíveis aos contaminantes presentes na água. Mesmo quantidades vestigiais de impurezas podem ter um impacto significativo na eficiência e precisão da reação. A seguir, são apresentados os principais requisitos para a água do grau de PCR:
Baixo conteúdo iônico
Íons como sódio, potássio, cálcio e magnésio podem interferir na reação de PCR, afetando a atividade da enzima de DNA polimerase. A alta força iônica também pode causar ligação não específica de iniciadores e modelos de DNA, levando a produtos de amplificação falsa. Portanto, a água do grau de PCR deve ter um baixo teor iônico, normalmente com uma resistividade de pelo menos 18,2 MΩ · cm.
Baixo conteúdo orgânico
Contaminantes orgânicos, como proteínas, ácidos nucleicos e carboidratos, podem inibir a reação de PCR, ligando -se à enzima de DNA polimerase ou competindo com os iniciadores de ligação ao modelo de DNA. A água do grau de PCR deve ter um baixo teor orgânico, normalmente com um carbono orgânico total (TOC) inferior a 5 ppb.
Níveis baixos de endotoxina e nuclease
As endotoxinas são lipopolissacarídeos encontrados nas paredes celulares de bactérias gram-negativas. Eles podem causar inflamação e respostas imunes nos organismos vivos e também podem interferir na reação de PCR inibindo a enzima da DNA polimerase. As enzimas nuclease podem degradar o modelo de DNA e os iniciadores, levando a uma perda de eficiência de amplificação. A água do grau de PCR deve ter baixos níveis de endotoxina e nuclease, normalmente com menos de 0,03 UE/ml de endotoxina e níveis indetectáveis de nucleases.
Capacidades dos sistemas de água de laboratório EDI
O EDI é um processo contínuo de purificação de água sem produtos químicos que combina troca de íons e eletrodiálise para remover íons da água. Nossos sistemas de água do LAB EDI são projetados para produzir água de alta qualidade que atenda aos requisitos estritos de várias aplicações de laboratório, incluindo a PCR. Aqui estão alguns dos principais recursos e capacidades de nossos sistemas de água do LAB EDI:
Alta resistividade
Nossos sistemas de água EDI de laboratório são capazes de produzir água com uma resistividade de até 18,2 MΩ · cm, que atende ao requisito de baixo teor iônico na água do grau de PCR. A alta resistividade é alcançada através de uma combinação de resinas de troca iônica e membranas de eletrodiálise, que removem íons da água para um nível muito baixo.
Baixo conteúdo orgânico
Além de remover íons, nossos sistemas de água de Lab EDI também estão equipados com filtros de carbono ativados e membranas de ultrafiltração para remover contaminantes orgânicos da água. Esses filtros podem efetivamente remover proteínas, ácidos nucleicos e carboidratos, garantindo que a água tenha um baixo teor orgânico. O TOC da água produzido por nossos sistemas de água EDI de laboratório é tipicamente menor que 5 ppb, o que atende à exigência de água do grau de PCR.
Níveis baixos de endotoxina e nuclease
Nossos sistemas de água EDI de laboratório são projetados para minimizar a presença de endotoxinas e nucleases na água. A água é passada por uma série de filtros e membranas que removem bactérias e outros microorganismos, reduzindo o risco de contaminação por endotoxina. Além disso, a água é tratada com luz ultravioleta para inativar quaisquer microorganismos e nucleases restantes. Os níveis de endotoxina e nuclease da água produzidos por nossos sistemas de água EDI EDI são tipicamente muito baixos, atendendo aos requisitos para a água do grau de PCR.
Adequação de nossos sistemas de água de laboratório EDI para PCR
Com base nos requisitos para a água do grau de PCR e nas capacidades de nossos sistemas de água do LAB EDI, posso dizer com confiança que nossos sistemas são adequados para aplicações de PCR. Aqui estão algumas das razões pelas quais:
Produção de água de alta qualidade
Nossos sistemas de água do LAB EDI são projetados para produzir água de alta qualidade que atenda aos requisitos estritos da PCR. A água possui baixo teor iônico, baixo teor orgânico e baixos níveis de endotoxina e nuclease, garantindo que não interfira na reação da PCR ou introduzirá resultados falsos.
Consistência e confiabilidade
Nossos sistemas de água do LAB EDI são construídos com componentes de alta qualidade e tecnologia avançada, garantindo uma produção de água consistente e confiável. Os sistemas estão equipados com sensores e controladores que monitoram a qualidade da água em tempo real e ajustam o processo de purificação conforme necessário para manter a qualidade da água desejada. Isso garante que a água produzida por nossos sistemas seja sempre da mais alta qualidade, fornecendo resultados confiáveis em aplicações de PCR.
Soluções personalizáveis
Entendemos que diferentes laboratórios têm requisitos diferentes para a qualidade e o volume da água. É por isso que oferecemos uma variedade de sistemas de água do LAB EDI para atender às necessidades específicas de nossos clientes. NossoSistema de água desionizada da série média Qé adequado para laboratórios de tamanho médio com demanda moderada de água, enquanto nossoSistema de água desionizada da série BASIC-Qé ideal para pequenos laboratórios com espaço e orçamento limitados. Para grandes laboratórios com alta demanda de água, oferecemos nossoSistema de água desionizada da série Master-Q, que pode produzir até 100 litros de água de alta qualidade por hora.
Conclusão
Em conclusão, nossos sistemas de água do LAB EDI são adequados para aplicações de PCR. Eles são capazes de produzir água de alta qualidade que atenda aos requisitos estritos da água do grau de PCR, incluindo baixo teor iônico, baixo teor orgânico e baixos níveis de endotoxina e nuclease. Os sistemas também são consistentes, confiáveis e personalizáveis, fornecendo uma solução econômica para laboratórios de todos os tamanhos.
Se você estiver interessado em aprender mais sobre nossos sistemas de água do LAB EDI ou gostaria de discutir suas necessidades específicas de purificação de água, entre em contato conosco. Nossa equipe de especialistas ficará feliz em ajudá -lo a encontrar a solução certa para o seu laboratório.
Referências
- Sambrook, J. & Russell, DW (2001). Clonagem molecular: um manual de laboratório. Cold Spring Harbor Laboratory Press.
- Innis, MA, Gelfand, DH, Sninsky, JJ, & White, TJ (Eds.). (1990). Protocolos de PCR: um guia para métodos e aplicativos. Academic Press.
- Watson, JD, & Crick, FHC (1953). Estrutura molecular dos ácidos nucleicos; uma estrutura para o ácido nucleico da desoxirribose. Nature, 171 (4356), 737-738.
